CE3F4

常用名：CE3F4

CAS号：143703-25-7

英文名：CE3F4

中文别名：N/A

CE3F4名称

中文名：CE3F4
英文名：CE3F4
英文别名：更多

CE3F4生物活性

描述：CE3F4是一种选择性的Epac1拮抗剂,对Epac1和Epac2(B)的IC50值分别为10.7μM和66μM。
相关类别：信号通路>>其他>>其他研究领域>>代谢疾病
靶点：

IC50:10.7μM(Epac1),66μM(Epac2(B))[1]

体外研究：CE3F4是Epac1的选择性拮抗剂,Epac1和Epac2(B)的IC50分别为10.7μM和66μM。CE3F4在Epac1上比(S)-立体异构体((S)-CE3F4,IC50,56μM)更具活性,但活性低于(R)-CE3F4(IC50,5.8μM)。CE3F4(50μM)对Epac1的GEF活性的抑制活性高于Epac2(AB)或Epac2(B)[1]。CE3F4降低了由007诱导的Epac1的交换活性,IC50为23±3μM。CE3F4(40μM)特异性抑制Epac1鸟嘌呤核苷酸交换活性而不干扰Rap1活性或Epac1-Rap1相互作用。CE3F4对PKA活性没有影响。CE3F4(20μM)抑制活体培养的HEK293细胞中Epac诱导的Rap1活化[2]。CE3F4(20μM)显着抑制INS-1细胞中葡萄糖刺激的ERK活化晚期[3]。
激酶实验：为了确定Epac1交换活性，将200nM预装有bGDP的纯化GST-Rap1A在22℃下在交换缓冲液（50mMTris-HCl（pH7.5），50mMNaCl，5mMMgCl2,5mM1,4-中孵育。在100nM纯化的GST-Epac1或GST-Epac1-Cat存在下，二硫赤藓糖醇，5％甘油，0.01％NonidetP-40）;20μM未标记的GDP;和确定的cAMP，环核苷酸类似物和测试化合物（CE3F4）的浓度。实验在黑色384孔板中进行，终体积为30μL。使用多标记板读数器测量bGDP荧光（激发，480nm和发射，535nm）[2]。
细胞实验：将细胞在96孔黑壁板中于37℃和5％CO2培养过夜，然后在磷酸盐缓冲盐水中洗涤两次。将细胞在37℃和5％CO2下在无葡萄糖的改良KRBH中预孵育2小时，所述KRBH补充有0.05％不含脂肪酸的BSA。倾析出预孵育缓冲液，并用KRBH中的18mM葡萄糖刺激细胞。在葡萄糖刺激之前，将细胞与或不与抑制剂（CE3F4）在改良的KRBH中在37℃和5％CO2下孵育30分钟。通过倾析处理并用4％甲醛固定细胞，在指定的时间点终止反应。在使用药理学抑制剂的实验中，在葡萄糖刺激开始后10分钟终止反应。使用Phospho-ERK1（T202/Y204）/ERK2（T185/Y187）基于细胞的ELISA测量总ERK和pERK。在450nm处测量总ERK1/ERK2，在360nm处激发，并且使用Synergy4微量板读数器在540nm处激发在540nm处测量磷酸化ERK1/ERK2。数据表示为pERK与总ERK的比率，然后归一化并表示为基础折叠或％葡萄糖反应[3]。
参考文献：

[1].CourilleauD,etal.The(R)-enantiomerofCE3F4isapreferentialinhibitorofhumanexchangeproteindirectlyactivatedbycyclicAMPisoform1(Epac1).BiochemBiophysResCommun.2013Oct25;440(3):443-8.

[2].CourilleauD,etal.IdentificationofatetrahydroquinolineanalogasapharmacologicalinhibitorofthecAMP-bindingproteinEpac.JBiolChem.2012Dec28;287(53):44192-202.

[3].PrattEP,etal.Ca2+influxthroughL-typeCa2+channelsandCa2+-inducedCa2+releaseregulatecAMPaccumulationandEpac1-dependentERK1/2activationinINS-1cells.MolCellEndocrinol.2016Jan5;419:60-71.

CE3F4物理化学性质

密度：1.8±0.1g/cm3
沸点：431.1±45.0°Cat760mmHg
分子式：C11H10Br2FNO
分子量：351.010
闪点：214.5±28.7°C
精确质量：348.911316
LogP：3.70
蒸汽压：0.0±1.0mmHgat25°C
折射率：1.641
储存条件：-20°C，密闭，干燥

CE3F4英文别名

：1(2H)-Quinolinecarboxaldehyde,5,7-dibromo-6-fluoro-3,4-dihydro-2-methyl-
：5,7-Dibromo-6-fluoro-2-methyl-3,4-dihydro-1(2H)-quinolinecarbaldehyde
：CE3F4